论文部分内容阅读
苹果树腐烂病是由Valsa mali 引起的苹果树上的重大真菌病害之一,严重危害我国苹果产业的发展.前人对苹果树腐烂病的防治技术进行了系统研究,但是对苹果树腐烂病的致病机理研究较少,尤其是对调控次级代谢相关的转录因子的功能还不明确.转录因子是反式作用因子中最大的家族,它是激活真核生物基因转录的蛋白质,可应对多种刺激,调控真核生物的次生代谢,对其生长发育具有重要影响.实验室前期通过生物信息学预测得到了一批上调表达的转录因子,选取了其中2 个(暂命名为Vmtf239 和Vmtf898)Zn(II)2Cys6类型的转录因子,利用PEG 介导的原生质体转化对目的基因进行敲除,通过PCR 及Southernblot 验证,成功获得2 个转录因子的突变体.通过对突变体进行营养生长、Na+胁迫生长、产孢观察及致病力测定,发现与野生型 03-8 相比,突变体在 PDA 培养基上培养 2d 和在含有 0.2 mol/L NaCl 的培养基上培养 7d 后的菌落大小均无显著差异;光照条件下培养40天繁殖体个数也无明显变化;在离体叶片上测定其致病性,结果显示突变体与野生型03-8相比差异亦不显著.表明这2 个转录因子可能不参与苹果树腐烂病菌菌丝生长、Na+胁迫、繁殖体的产生及致病过程,但它们与苹果树腐烂病菌生长发育其他方面的相关性有待进一步验证.