【摘 要】
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目的 检测骨髓间充质干细胞(MSC)向神经细胞分化前后和脑组织中转录因子OCT4、微管相关蛋白TAU和神经特异性烯醇化酶NES基因启动子区甲基化状态,探讨DNA甲基化调控在MSC向神经细胞分化中的作用.方法 体外分离培养大鼠骨髓MSC,用BHA/DMSO诱导第四代MSC向神经细胞分化,光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法检测TAU和NSE表达,甲基化特异性PCR (MSP)测序法检测MSC、MSC分
【机 构】
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郑州大学干细胞研究中心,郑州大学病理生理学教研室,郑州450050 郑州大学干细胞研究中心,郑州大
【出 处】
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中国神经科学学会第九届全国学术会议暨第五届会员代表大会
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目的 检测骨髓间充质干细胞(MSC)向神经细胞分化前后和脑组织中转录因子OCT4、微管相关蛋白TAU和神经特异性烯醇化酶NES基因启动子区甲基化状态,探讨DNA甲基化调控在MSC向神经细胞分化中的作用.方法 体外分离培养大鼠骨髓MSC,用BHA/DMSO诱导第四代MSC向神经细胞分化,光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学法检测TAU和NSE表达,甲基化特异性PCR (MSP)测序法检测MSC、MSC分化神经细胞和脑组织三组的Oct4、 Tau和NSE启动子区甲基化状态.结果 MSC诱导分化后呈现神经细胞样形态,NSE和TAU染色阳性.MSC、MSC分化神经细胞和脑组织的Oct4启动子区甲基化修饰百分比77.8％、87.5％和78.6％,各组之间无明显差异.Oct4启动子区-123 bp的CpG在MSC维持低甲基化状态(11.1％),明显低于脑组织(71.4％)和MSC分化神经细胞(50.0％).Tau和NSE启动子区在MSC分化前后和脑组织中均保持未甲基化状态,组间无差异.结论 MSC向神经细胞前后Tau和NSE基因呈去甲基化状态,而Oct4基因甲基化增强.
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