干扰素诱导跨膜蛋白3(FITM3)是近年发现的抗病毒蛋白,研究黄羽肉鸡IFITM 3基因结构、蛋白特性及其在鸡体内的分布情况,为鸡病毒病的防治提供理论依据。本研究根据基因库公布的鸡IFITM 3基因序列,设计特异性引物,扩增目的基因,构建克隆载体,克隆鸡IFITM3基因,使用生物信息学分析方法,对鸡IFITM3基因结构及预测的蛋白结构进行分析;构建原核表达载体,表达IFTIM3蛋白,并进行蛋白纯化,制备多克隆抗体;利用免疫组织化学和荧光定量PCR技术分析IFITM3在鸡消化器官和免疫器官中的分布情况。本实验成功构建了黄羽肉鸡IFITM3基因的克隆载体,酶切鉴定表明,克隆载体构建成功,测序结果表明,黄羽肉鸡的IFITM3基因克隆成功。序列分析表明,黄羽肉鸡IFITM3基因与鸟类(白喉雀)处在同一分支,进化距离最小;蛋白序列全长113个氨基酸,含有两个长度相似的跨膜区和一个CD225结构域;原核表达结果表明,获得11.55KU重组蛋白,亲和层析纯化重组蛋白,并获得兔抗鸡IFITM3阳性血清。免疫组化结果初步说明,IFITM3阳性细胞在鸡免疫器官和消化器官中均有分布,其中免疫器官中,法氏囊阳性细胞最多,消化器官中,十二指肠阳性细胞最多;RT-PCR和荧光定量PCR的结果与免疫组化的结果一致。本实验成功对黄羽肉鸡IFITM3基因进行了克隆和原核表达,并制备了抗IFITM3多克隆抗体,同时,初步探明了IFITM3蛋白在黄羽肉鸡免疫器官和消化器官中的分布情况。