H9亚型禽流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xukej

【摘要】

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【作者】

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包红梅王秀荣陈化兰

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江哈尔滨150001

【出处】

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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

【发表日期】

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2014年12期

【关键词】

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H9亚型禽流感病毒快速检测环介导恒等温扩增基因序列

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为了建立快速检测H9亚型禽流感病毒(AIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H9亚型AIV HA基因序列,设计了一套特异性识别HA基因序列中6个不同区段的环介导恒等温扩增(LAMP)引物,建立了基于LAMP技术检测H9亚型AIV的检测方法.结果表明,该方法对H9AIV RNA的最小检测限为0.01 pfu,灵敏度高于常规一步法RT-PCR的100倍;扩增反应可在30 min内完成;在反应体系中添加核黄绿素(FD)荧光染料后,可通过肉眼观察有无绿色荧光直接判定结果.灵敏性及特异性试验表明,该方法灵敏度高、特异性好,能够作为H9亚型AIV的快速诊断方法.

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