巯烯点击反应制备核酸适配体亲和杂化整体柱用于凝血酶的富集检测

来源 :第六届华东地区色谱质谱学术报告会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangmingli1213
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本文通过“巯-烯”点击化学反应,制备了一种新型的核酸适配体亲和杂化整体柱材料。首先,以四甲氧基硅烷(TMOS)和γ-甲基丙烯酸丙基三甲基硅烷(γ-MAPS)为单体,采用溶胶一凝胶法制备了表面含有双键的硅胶整体柱,之后利用“琉烯”点击化学反应将末端被琉基修饰的核酸适配体键合到含双键的杂化整体柱内。不仅优化了各种实验条件对整体柱材料形貌的影响,还利用IR, SEM, EA等手段对亲和柱材料的性质进行了表征,并以凝血酶作为模型分析物,考察了亲和柱对蛋白质的富集能力。随后利用凝血酶与发光底物的作用,实现了对蛋白质的快速、灵敏的检测。实验结果显示核酸适配体亲和柱具备较大的比表面积和柱容量,对凝血酶有较强的富集效果,随后的酶反应信号放大方法,也大大降低了凝血酶的检测限。
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