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目的 采用胰岛素、游离脂肪酸体外诱导培养法建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,为研究胰岛素抵抗的发生机制及筛选改善胰岛素抵抗的辅助降血糖保健食品提供体外细胞模型.方法 以人肝癌HepG2细胞为研究对象,采用不同浓度胰岛素(100、50、25、10、5、2.5、1、0.10、0.05、0.25ug/ml)对HepG2细胞进行不同时间(12、24、36、48、60h)的诱导；采用不同浓度游离脂肪酸(1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0.08、0.06、0.04、0.02mmol/1)对HepG2细胞进行不同时间(6、12、18、24、36、48h)的诱导；通过MTT法进行细胞活性评价及葡萄糖氧化酶法测定HepG2细胞葡萄糖消耗量.结果 与正常组比较,当游离脂肪酸≧0.6 mmol/1时,其作用时间≧12h时,细胞活性明显下降(P＜0.05),当游离脂肪酸介于0.2～0.4mmol/l时,其作用时间≧24h时,细胞活性明显下降(P＜0.05),当游离脂肪酸≦0.1mmol/1时,其作用时间≧36h时,细胞活性明显下降(P＜0.05).葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法实验表明,0.2 mmol/1游离脂肪酸诱导处理18h是HepG2细胞产生胰岛素抵抗的最适条件.与正常组比较,不同浓度胰岛素(25、10、5、2.5、1、0.10、0.05、0.25ug/ml)对HepG2细胞进行不同作用时间(12、24、36、48、60h),细胞活性的差异没有统计学意义.HepG2细胞在1～100 ug/ml胰岛素中作用12h,葡萄糖消耗量明显减少10％以上(P＜0.05),HepG2细胞在1～25 ug/ml胰岛素中作用36h,葡萄糖消耗量明显减少20％以上(P＜0.05),1～25 ug/ml胰岛素诱导处理36h是HepG2细胞产生胰岛素抵抗的最适条件. 结论 通过高浓度胰岛素和游离脂肪酸均可成功诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗,具有建模周期短、操作简便的优点,该模型可用于保健食品辅助降血糖功能的筛选及降糖机制研究.