【摘 要】
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目的：获得杜氏盐藻Dunaliella salina硝酸盐还原酶cDNA片段。方法：根据Dunaliella tertiolec-ta、衣藻、团藻等生物硝酸盐还原酶nitrate reductase,NR高度保守序列EGWWEKP、WNVMGMM设计一对简并引物，以含硝酸盐培养基培养的的盐藻cDNA为模板，进行PCR扩增，产物经T-A克隆转化至Jm109大肠杆菌中，经筛选后测序，将测序结果推导成氨
【机 构】
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郑州大学基础医学院,河南郑州450052
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目的：获得杜氏盐藻Dunaliella salina硝酸盐还原酶cDNA片段。
方法：根据Dunaliella tertiolec-ta、衣藻、团藻等生物硝酸盐还原酶nitrate reductase,NR高度保守序列EGWWEKP、WNVMGMM设计一对简并引物，以含硝酸盐培养基培养的的盐藻cDNA为模板，进行PCR扩增，产物经T-A克隆转化至Jm109大肠杆菌中，经筛选后测序，将测序结果推导成氨基酸序列进行同源性分析。
结果：在盐藻中所获得的cDNA片段，核苷酸长度为381bp，编码127个氨基酸。推导的氨基酸序列与下列物种的硝酸盐还原酶进行同源性比较：Dunaliella tertiolecta为88.2％，团藻为78％，衣藻为67％，小球藻为59％。并在Genbank进行Search for short nealy exact matches，结果显示所扩增片段的蛋白质为Mo-Co_dimer结构，符合硝酸盐还原酶的结构特征。
结论：所克隆的序列为盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段。
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