原发性肝细胞癌患者癌组织局部和外周血中NK细胞和NK样T细胞的研究

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研究背景:NK(CD3~-CD56~+]细胞和NK样T(CD3~+CD56~+]细胞在正常肝脏组织中高比例的特异性富集,并且在抗肿瘤免疫中发挥着很重要的作用。目的:本研究的目的就在于较为系统的研究,在原发性肝癌患者体内,这两个细胞亚群在细胞比例、表型和功能方面发生的变化。方法:通过收集肝癌病人术后新鲜的肝癌组织和癌旁组织标本以及外周血标本,从中分别分离出TIL(Tumor-infiltrating lymphocytes)、NIL(Non-tumor-infiltrating lymphocytes)和PBMC(Periphery blood mononuclear cells),经过不同的流式染色方案和细胞功能实验,着重对于NK细胞和NK样T细胞的细胞数量、表型和功能改变进行检测。结果:与NIL相比,TIL中的NK细胞(6 324±1 559 VS 14 52±2 336)和NK样T细胞(6 315±1 002 VS17 16±1 804)比例均显著下降,而与正常人PBMC相比,肝癌病人PBMC中的NK细胞和NK样T细胞比例并未发生明显改变;与NIL明显不同,TIL的NK样T细胞群体中有高比例的FOXP3~+细胞富集(21 96±5 283 VS1.006±0.126 n=16),而在相同的肝癌患者PBMC的NK样T细胞群体中并没有检测到高比例的FOXP3的阳性表达:而对于NIL细胞而言,无论是TIL还是PBMC,均未检测到FOXP3~+细胞的富集:通过细胞表型检测和功能检测,发现CD3~+CD56~+FOXP3~+细胞群体具有与传统Treg细胞相类似的特异性表型和免疫抑制调节功能,具体表现在高比例的表达CD25,CD45RO和CTLA-4,而低比例的表达CD127和IFN-γ,并且能够在共育培养体系中抑制naiveT细胞的增殖。结论:这是首次关于CD3~+CD56~+FOXP3~+细胞的发现研究报道,可能揭示了一种新的抑制性固有免疫在肝癌发生发展中的存在,能够为日后肝癌免疫治疗干预提供新的切入点和线索。
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