【摘 要】
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目的:明确FGFR3对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、BMSCs向软骨细胞分化的作用. 方法:利用(R3CKOf/f×CreERT2)小鼠,培养上述小鼠的BMSCs,Tamoxifen诱导敲除FGFR3并进行软骨
【机 构】
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第三军医大学大坪医院骨代谢与修复中心,全军创伤中心实验室,创伤国家重点实验室临床分室,重庆市渝中区长江支路10号 400042
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目的:明确FGFR3对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、BMSCs向软骨细胞分化的作用.
方法:利用(R3CKOf/f×CreERT2)小鼠,培养上述小鼠的BMSCs,Tamoxifen诱导敲除FGFR3并进行软骨分化诱导,采用细胞计数、定量PCR等手段检测细胞的增殖、分化情况.
结果:分离培养(R3CKOf/f×CreERT2)小鼠BMSCs,倒置显微镜下观察发现接种48h内基本上铺展呈小的短梭形或三角形,密度大时呈菊花状、漩涡状或平行排列.Tamoxifen (0.5μM)处理后,FGFR3敲除效率为60％.敲除FGFR3后对BMSCs的增殖没有影响;敲除FGFR3后BMSCs向软骨分化过程中软骨分化相关标记基因(Col10,Comp,Ihh,Mmp13)表达升高.
结论:以上的研究结果表明FGFR3对BMSCs的增殖没有明显作用，FGFR3可能抑制BMSCs向软骨细胞的分化。这为下一步构建FGFR3可控的组织工程软骨提供了实验基础和理论依据。
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