【摘 要】
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目的:观察在糖尿病情况下肾组织中EPHX2基因表达变化,分析高糖对EPHX2启动子潜在的调控区域,为糖尿病肾病防治提供新的靶点.方法:高脂饲料合并STZ诱导模拟人类2型糖尿病大鼠,采用实时定量PCR方法检测肾组织EPHX2及其相关炎症因子NF-κBP65 mRNA水平的变化.构建EPHX2基因启动子系列缺失片段的重组质粒,利用脂质体转染大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1),通过双荧光素酶报告基因检测
【机 构】
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中日友好医院临床医学研究所药物药理室 北京,100029
【出 处】
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中华中医药学会第二十六次肾病分会学术交流会议
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目的:观察在糖尿病情况下肾组织中EPHX2基因表达变化,分析高糖对EPHX2启动子潜在的调控区域,为糖尿病肾病防治提供新的靶点.
方法:高脂饲料合并STZ诱导模拟人类2型糖尿病大鼠,采用实时定量PCR方法检测肾组织EPHX2及其相关炎症因子NF-κBP65 mRNA水平的变化.构建EPHX2基因启动子系列缺失片段的重组质粒,利用脂质体转染大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1),通过双荧光素酶报告基因检测EPHX2启动子活性,明确其启动子活性区域.进而给予0.5mM、15mM和30mM葡萄糖浓度刺激48h,检测葡萄糖浓度对启动子功能的影响,明确EPHX2启动子对高糖的应答区域.
结果:糖尿病大鼠肾组织EPHX2和NF-κB P65 mRNA水平与正常组相比显著增加;EPHX2启动子活性的最强区域为-1027～+58;高糖刺激后,该区域出现更强的应答效应,活性明显增加并具有统计学意义.
结论:高糖可以导致EPHX2和P65基因转录水平表达的增加.EPHX2基因启动子对高糖刺激最强的应答区域位于-1027-+58,可能是未来药物干预的潜在靶点.
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