【摘 要】
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目的:建立便捷高效的血清RNA提取方法,用于HCV RNA的定量检测.方法:采用荧光定量RT-PCR检测三种RNA提取方法:新的RNA提取方法,改良一步法和Trizol法对系列稀释后的HCV阳性血
【机 构】
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中山医科大学达安基因诊断中心(广东广州)
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目的:建立便捷高效的血清RNA提取方法,用于HCV RNA的定量检测.方法:采用荧光定量RT-PCR检测三种RNA提取方法:新的RNA提取方法,改良一步法和Trizol法对系列稀释后的HCV阳性血清RNA提取结果,统计分析比较三种提取方法的灵敏性、重复性、便捷程度等,并对新法试剂的稳定性,用量等进行对比.结果:新的RNA提取方法灵敏度较一步法高16倍,较Trizol法高40倍.提取得到的HCV RNA量,新法较一步法平均高11.3倍,较Trizol法高68.6倍.三种方法的重复性均较好,其变异系数(CV)均<5﹪.新法的步骤少、耗时仅约20min、试剂简单,成本低廉.其试剂放在4°C3m,室温2w,37°C48h,提取效率几无影响.结论:新的RNA提取方法具有简捷、价廉、稳定、提取效率及灵敏度更高等优点,非常适合于HCV RNA定量检测时标本的提取.
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