【摘 要】
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为了研究Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-1)在鸭胚成纤维细胞(DEF)中增殖规律,本研究将1型鸭肝炎病毒野毒株(ZJ-08株)接种DEF细胞,连续传代3次后,首先用倒置显微镜观察病毒对细胞的致病
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所; 湖南农业大学动物医学院; 濉溪县动物检疫站;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30870114;31101848);公益性农业科研专项(201003012);“863”计划(2011AA10A200)
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为了研究Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-1)在鸭胚成纤维细胞(DEF)中增殖规律,本研究将1型鸭肝炎病毒野毒株(ZJ-08株)接种DEF细胞,连续传代3次后,首先用倒置显微镜观察病毒对细胞的致病变效应(CPE),然后收集细胞培养物,分别用RT-PCR,间接免疫荧光方法和蛋白免疫印迹试验检测病毒蛋白在细胞中的表达和复制情况。同时,还测定了DHV-1的半数感染剂量(TCID50),绘制了DHV-1在DEF细胞中的一步生长曲线。研究结果显示,DHVZJ-08株能够在DEF上良好增殖,在显微镜下可观察到典型的CPE,病毒蛋白在细胞中也获得了良好表达,并与DHV-1特异性抗体发生反应。一步增殖曲线显示ZJ-08株感染DEF以后,12h开始增殖,36h-60h进入快速增殖期,72h达到峰值,TCID50为10-4.3/ml。本研究为进一步研究DHV-1的致病机理和细胞灭活疫苗等提供了有价值的信息。
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