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目的:初步验证以CD105作为ADSCs分选标志的可行性,为将来ADSCs分选纯化技术的建立提供理论和实践依据。
方法:应用携带磁珠的CD105抗体标记ADCs中CD105+细胞,通过磁珠分离器(MACS)将ADCs分选为CD105+和CD105-两个细胞群体,以组织学染色、免疫组化染色、RT-PCR检测等方法分别比较两群细胞生长曲线、克隆形成能力及成软骨、成骨、成脂分化潜能。
结果:Giemsa染色示:CD105+ADCs克隆形成能力显著优于CD105-ADCs(p<0.05);Ⅱ型胶原免疫组化染色,Alizarn Red染色及oilRed染色分别显示CD105+ADCs在Ⅱ型胶原的表达,钙结节的沉积,脂滴的形成上均优于CD105-ADCs;RT-PCR检测显示CD105+ADCs Ⅱ型胶原,AKP,Leptin、PPARγ2的表达量明显高于CD105-ADCs,两者具有显著性差异(p<0.05)。
结论:CD105+ADCs无论在克隆形成能力,成脂、成骨及成软骨分化方面均明显优于CD105-ADCs,通过MACS分选ADCs中CD105+ADCs,能够将多数间充质干细胞从混杂细胞中分离出来,CD105可以作为ADSCs初步分选的一个相对特异性标志。