重组人B淋巴细胞刺激因子工程菌高密度发酵

来源 :2008中国药学会学术年会暨第八届中国药师周 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong485
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为实现重组人B淋巴细胞刺激因子工程菌E.coli DH5/pKKH-BLyS的高密度、高表达发酵,首先进行了培养条件的摸索,确定了该工程菌的最佳培养pH值、诱导剂IPTG的浓度、诱导的最佳时间段、溶氧范围以及补料的流加方式等,根据优化条件,用5L自控发酵罐进行三批重复发酵,最终菌体密度均达到25 A600以上,菌体获得量均可达湿重30g以上,目的蛋白质的表达量占菌体总蛋白的40%左右,保持并超过了该重组蛋白在试管和摇瓶中的表达量。此发酵工艺具有周期短、产量高、重复性稳定性好等特点,为下游的纯化和进一步的大规模生产奠定了基础。
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