变异链球菌表面蛋白A区和葡糖基转移酶催化区嵌合真核质粒的构建及表达

来源 :全国第八次牙体牙髓病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bjzmht
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  目的:将变异链球菌表面蛋白PAcA区编码基因spap/A和葡糖基转移酶催化区(CAT) 编码基因gtfB/CAT的序列克隆到真核载体pVAX1中,构建spap/A-gtfB/CAT嵌合质粒pVAX1-SG,并观察其在哺乳动物细胞COS-7中的表达情况。方法:通过基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1-SG;通过脂质体转染法将其转染至COS-7细胞中,然后经免疫组化SABC法检测其在细胞中的表达。结果:真核表达质粒pVAX1-SG经酶切分析证实携带spap/A和gtfB/CAT片段,经测序测定,碱基对同源性达100%;pVAX1-SG转染的细胞胞质呈褐色染色,阴性对照细胞胞质无着色。结论:成功构建真核表达质粒pVAX1-SG,所携带的基因序列正确,能够在真核细胞COS-7中正确表达融合蛋白。
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