【摘 要】
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目的 确定成体西藏小型猪胰岛体外分离、纯化的理想条件,为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛。方法 对比不同质量浓度(1g/l,2g/l,3g/l,4g/l)和同一质量浓度条件下不同
【机 构】
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东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司,东莞523808;南方医科大学实验动物中心暨比较医学研究所,广州510515
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目的 确定成体西藏小型猪胰岛体外分离、纯化的理想条件,为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛。方法 对比不同质量浓度(1g/l,2g/l,3g/l,4g/l)和同一质量浓度条件下不同时间点(0min,15min,30min,45min,60min,75min,90min)胶原酶分离获得胰岛的数量和效果。使用Ficoll400密度梯度离心、淋巴分离液分离、离心、静置4种方法纯化分离胰岛悬液,比较最终收集到的胰岛数量和效果。结果 确定了不同质量浓度的胶原酶获取胰岛的最佳时间,胶原酶1 g/l组为45min,2g/l、3g/l和4g/l组为30min,各组在最佳时间点获得胰岛的数量最多的为1g/l组,各组在最佳时间点获得的胰岛形态完整,具有活性;4种纯化方法中,获得的胰岛数量由多到少依次为静置>离心>淋巴分离液离心>ficoll400密度梯度离心,4种方法获得的胰岛均具有活性。结论 在组织块剪碎消化的情况下,胶原酶质量浓度1g/l、消化时间45min的分离条件可获得数量较多的胰岛,静置的纯化手段收集到的胰岛数量最多。
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