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Myostatin gene knockout in bovine fibroblasts induced by zinc finger nucleases
【机 构】
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State Key Laboratory for Agrobiotechnology,China Agricultural University,Beijing 100193
【出 处】
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第六次全国动物生物技术学术研讨会
【发表日期】
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2011年6期
其他文献
为了进一步研究FUT1基因的功能，充分挖掘我国地方猪种中特有的遗传特性，本文采用比较基因组学的方法对多个物种的基因进行了对比，本文希望利用基因组之间编码序列和结构上的同源性，通过已知物种基因组的定位信息比较其他物种基因定位，从而揭示该基因潜在的功能。
本文介绍SMYD3在卵母细胞和体外受精中的表达表明SMYD3在卵母细胞和成熟过程中都起作用。结合敲减结果分析，说明SMYD3对成熟信号通路可能没有影响，其在成熟过程中积累，可能与RNA聚合酶II形成复合体，或与特定的DNA序列结合，调节母源性基因的转录激活，进而影响受精后胚胎的正常发育。荧光定量PCR显示，SMYD3从8细胞后表达开始升高，到桑甚胚期达到最高，然后到囊胚期开始下降;我们推测SMYD
本研究应用Solexa高通量测序的方法揭示了猪甲状腺组织中的miRNA表达谱，这一方面可以进一步丰富猪miRNA数据库，另一方面还可以提供猪甲状腺中miRNA的表达情况，从而为研究miRNA在猪甲状腺细胞分化和生长发育过程中的作用奠定基础。利用测序结果定制的miRNA芯片已经用于检测金华猪不同生长阶段甲状腺miRNA的表达情况。下一步本研究将运用Real-time PCR等方法对结果进行进一步验证
卵母细胞成熟和胚胎发育过程中基因表达是动力变化的，而且基因间表达量是相互协调的，利用siRNA技术可以在不影响基因组DNA的条件下快速高效的调控基因表达，研究基因功能和基因之间的互作。设计的DnmtloC端干扰片段为有效序列，Dnmtlo扰低后对卵母细胞成熟率没有明显影响，但能够明显降低孤雌胚胎的发育，在卵母细胞成熟和胚胎发育过程中Dnmtlo是胞质定位的，理应不会发挥作用，但孤雌胚胎发育结果表明
本实验确定了TSA处理供体细胞和核移植胚胎的最适条件分别为250nmol/L,24h和40nmol/L,24h，发现TSA同时处理供体细胞和克隆胚胎可以显著的促进核移植胚胎的体外发育;同时还研究了TSA对转基因核移植胚胎中外源基因表达的影响，发现TSA处理转基因成纤维细胞可以显著提高外源基因的表达水平。本实验进一步了解外源基因在转基因动物中的表达情况及其调节机制，为转基因动物的培育奠定理论与技术基
根据动物受精的生殖生理学原理，某公司研究开发了以添加异种动物精子为基础的奶牛性控冻精生产新技术(专利技术)，使该产品的生产成本降低50-60％，生产效率提高2-3倍，已经在1500余个用户推广应用50万支以上，取得了明显的经济效益和社会效益，把家畜性控技术推向了真正的产业化普及应用阶段。
本研究采用原位杂交的方法分析了AnxA1在胚胎和子宫中的表达情况，证实了AnxAl mRNA在胚胎、子宫腔上皮、腺上皮以及蜕膜组织细胞中呈现不同水平表达。结果说明AnxAl可能参与胚胎的着床和基质细胞的蜕膜化过程。在延迟着床的小鼠子宫中AnxA1 mRNA表达于子宫腔上皮，在延迟着床激活模型中AnxA1 mRNA的表达呈现类似正常妊娠第5天的特异性强表达，说明AnxA1的表达可能受活化胚泡的诱导。
本研究构建了猪腮腺特异表达木聚糖酶基因xynB的载体，通过对猪胎儿成纤维细胞转染、筛选及鉴定，然后通过体细胞核移植技术，最终获得了转xynB基因猪。
本研究改变了黑曲霉木聚糖酶基因密码子的使用频率，优化了一些在猪体内稀有密码子，从而提高了密码子在猪的适应性。重组质粒pcDNA-xynB3转染PK15细胞时，用了包含xynB的重组质粒pcDNA-xynB进行比较，保证了实验的一致性，结果显示进行密码子优化后的xynB3表达量有所提高，细胞酶液粗酶活也随之提高，证明此改造的基因优于原始基因，有望能更好地用于转基因。
本实验以绿头鸭血为材料，利用细胞分离方法结合RT-PCR技术从绿头鸭的总RNA中成功的克隆出RIG-IcDNA，与以往实验比减少了对动物的伤害。与NCBI已发表的序列比对，一致性为99％，这可能是地方个体生长发育过程中或操作过程中造成的差异。从不同物种RIG-I系统发育树看出，绿头鸭与斑胸草雀的亲缘关系最近，与其他的关系较远。而人类与称猴关系较近，这种分类现象比较符合生物进化的规律。由于载体pLL