【摘 要】
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为了进行氯霉素残留的快速检测,采用重氮化法,分别将氯霉素(CAP)与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,制备免疫抗原(CAP-BSA),与卵清白蛋白(OVA)进行偶联,制备包被抗原(CAP-OVA),并
【机 构】
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河北北方学院河北省农产品质量安全分析检测重点实验室;
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为了进行氯霉素残留的快速检测,采用重氮化法,分别将氯霉素(CAP)与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联,制备免疫抗原(CAP-BSA),与卵清白蛋白(OVA)进行偶联,制备包被抗原(CAP-OVA),并通过紫外光谱扫描证明2种完全抗原偶联成功。将CAP-BSA免疫昆明小鼠,制备氯霉素多克隆抗体,并采用方阵滴定法对间接竞争ELISA检测条件进行优化。结果表明,2种完全抗原偶联成功,所制备抗体效价最高达1:128000,包被抗原最佳工作浓度为0.25μg/mL,最佳包被条件为37℃,1 h;最佳封闭液为5%羊血清;最佳封闭时间为37℃2 h;抗体最佳工作浓度为1:32000;酶标二抗的最佳工作浓度为1:4000,最佳作用时间为37℃,1 h。所建立的氯霉素残留间接竞争ELISA快速检测方法具有较高的特异性,可实现对氯霉素残留的快速检测。
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