分光光度法测定布氏菌疫苗浓度方法的建立

来源 :2010中国人兽共患病学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lhnyzz520
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研究目的:研究人用布氏菌疫苗浓度与吸光度值之间的相关性,建立用分光光度法测定待测疫苗吸光度值,从标准曲线中计算出待测布氏菌疫苗浓度的方法。 方法:确定分光光度法测定布氏疫苗浓度的特异性、测定波长及线性范围。四个专业实验室经对7批成品疫苗进行比浊,测定与细菌浊度标准管(相当于布氏菌浓度25亿/ml)浊度一致菌液的吸光度值及标准管对应浓度±20%(即30亿/ml和20亿/m”菌液的吸光度值,根据该结果制备布氏菌疫苗浓度测定用参考品。四个实验室应用该参考品分别对布氏菌疫苗进行协作测定,确定分光光度法测定布氏菌疫苗浓度的可行性。 结果:确定600nm作为吸光度测定波长,布氏菌疫苗浓度在10-50亿/ml之间时吸光度值与菌液浓度之间有很好的相关性(r=0.999,自由度==3P<0.O1)。成功制备了三种浓度(即20;25和30亿/ml)的布氏菌疫苗浓度测定用参考品,其吸光度值分别为0.384,0.484和0.575。经四个实验室应用该参考品对布氏菌疫苗进行协作测定,测定误差小于596。 结论:分光光度法具有良好的重现性,适用于布氏菌疫苗的浓度测定。
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