【摘 要】
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目的 长期高血糖通过非酶促糖基化形成晚期糖基化终末产物(AGE),人皮肤角质形成细胞(HK)移行能力下降阻碍创面愈合,探讨AGE对HK移行的影响及其原因可部分揭示糖尿病创面
【机 构】
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510120 广州,中山大学附属第二医院内分泌科
【出 处】
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中华医学会第九次全国内分泌学学术会议
论文部分内容阅读
目的 长期高血糖通过非酶促糖基化形成晚期糖基化终末产物(AGE),人皮肤角质形成细胞(HK)移行能力下降阻碍创面愈合,探讨AGE对HK移行的影响及其原因可部分揭示糖尿病创面难愈机制。方法 商品化的糖基化牛血清白蛋白(AGE-BSA)处理原代培养的HK,CCK-8检测AGE-BSA不同浓度梯度(0、25、50、75、100μg/ml及不同干预时间(24、48、72h)对HK活力的影响,筛选最佳的AGE-BSA刺激时间和浓度；Ⅰ型胶原模拟细胞外基质,AGE-BSA(BSA、0、25、50μg/ml)预处理48h,采用经典的体外迁移实验(Transwell小室和划痕实验)检测AGE-BSA在不影响细胞活力的情况下对HK移行的影响；qRT-PCR、明胶酶谱和ELISA方法检测细胞基质金属蛋白酶(MMP-9) mRNA、细胞培养上清MMP-9蛋白和活性水平,qRT-PCR检测组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)表达水平；免疫印迹和细胞化学检测磷酸化黏附斑激酶(p-FAK)和FAK细胞定位和表达水平；流式细胞仪检测细胞表面整合素α2表达率和平均荧光强度(MFI)的改变。
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