基于代谢组学的四君子汤、四物汤、八珍汤对14月龄雌性小鼠的作用

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目的:比较研究3月、14月龄雌性小鼠血浆的代谢生物标志物,进而从代谢层面,探讨补气、补血、气血双补代表方剂干预作用,揭示四君子汤、四物汤和八珍汤对14月龄雌性小鼠代谢生物标志物及其通路的影响,为进一步阐释补益气血剂干预实验动物增龄性改变及其相关性研究奠定基础。方法:采用3月龄ICR雌性小鼠10只作为对照组、选取14月龄ICR雌性小鼠40只随机分为四君子汤组、四物汤组、八珍汤组和空白对照组,三个给药组灌胃给药,3月龄组和空白对照组给同体积比生理盐水,利用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-TOF/MS)的代谢组学技术对小鼠血浆变化进行研究,采用主成分分析法(PCA)和正效偏最小二乘-判别分析法(OPLS-DA)分析相关的生物标志物,探讨四君子汤、四物汤和八珍汤对代谢标志物及其代谢途径的影响。结果:1.正、负离子条件下,14月龄空白对照组与3月龄青年对照组,在OPLS-DA的Scores图中区分明显,存在差异。2.正离子条件下,由PLS-DA分析后的Scores图得知14月龄空白对照组与3月龄青年对照组离散程度很强,两组样品能明显区分,三个给药组与14月空白对照组均能良好区分,证明三首方剂在正离子条件下,对14月龄雌性小鼠均有一定调节作用;数据库比对发现1种代谢标志物:D-赤藓糖-4磷酸,三方对该物质均有回调趋势,但无统计学意义(P>0.05)。3.负离子条件下,由PLS-DA分析后的Scores图得知14月龄空白对照组与3月龄青年对照组离散程度很强,两组样品能明显区分,三个给药组与14月空白对照组均能良好区分,证明三首方剂在负离子条件下,对14月龄雌性小鼠均有一定调节作用;数据库比对后6种代谢标志物:花生四烯酸、牛磺酸、乙醛酸、孕烯醇铜、柠檬酸、鹅脱氧胆酸。三方对花生四烯酸、牛磺酸、乙醛酸、孕烯醇铜、鹅脱氧胆酸均有回调效果(P<0.05),四君子汤对牛磺酸、孕烯醇铜、乙醛酸、柠檬酸的回调趋势较其他给药组效果明显(P<0.01);八珍汤对花生四烯酸、乙醛酸、鹅脱氧胆酸回调趋势较其他给药组效果明显(P<0.01)。结论:1.14月龄雌性小鼠与3月龄雌性小鼠比较发现,小鼠机体内花生四烯酸代谢、牛磺酸代谢、乙酸及二羧酸代谢、甾类激素生物合成、甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢、三羧酸循环、不饱和脂肪酸的生物合成、初级胆汁酸合成均发生增龄性改变,该改变与糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢异常相关。2.四君子汤、四物汤、八珍汤对14月龄雌性小鼠体内的糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢异常均可产生不同程度的改善作用。3.三方对糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢干预程度存在差异,根据三方对代谢标志物的回调效果推测,四君子汤对糖代谢、脂代谢、氨基酸代谢干预效果较好,八珍汤对脂代谢调节效果优于其他两组。
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