【摘 要】
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目的:利用激光共聚焦显微镜共定位来检测整合素4结合蛋白(ITGB4BP)和P311间的相互作用.方法:分别构建能在哺乳动物细胞中表达整合素4结合蛋白的绿色荧光融合蛋白EGFP-ITGB4
【机 构】
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第三军医大学西南医院烧伤研究所 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室 重庆400038
【出 处】
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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会
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目的:利用激光共聚焦显微镜共定位来检测整合素4结合蛋白(ITGB4BP)和P311间的相互作用.方法:分别构建能在哺乳动物细胞中表达整合素4结合蛋白的绿色荧光融合蛋白EGFP-ITGB4BP和表达P311的红色荧光融合蛋白RFP-P311的重组载体,经酶切鉴定正确后,共转染人胚肾293(HEK293)细胞后,激光共聚焦显微镜进行共定位观察.结果:构建好的重组载体pEGFP-ITGB4BP和pDsRed-P311经双酶切鉴定正确,转染293细胞后经激光共聚焦显微镜观察能分别表达融合蛋白EGFP-ITGB4BP和RFP-P311,并且二者主要分布在胞浆和胞核中,存在着共定位.结论:成功构建了EGFP-ITGB4BP和RFP-P311融合蛋白真核表达重组载体,在哺乳动物细胞中进行了表达与细胞内共定位观察证实二者可能存在着相互作用.ITGB4BP和P311在细胞内的信号转导研究提供了重要依据.
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