【摘 要】
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目的:突触核蛋白α-synuclein是帕金森(PD)病人路易小体的主要组成成分,其突变体及三倍体在家族性PD中的发现进一步表明该蛋白与PD发生密切相关.在生理、病理条件下及在实验
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050
【出 处】
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中国药理学会生化与分子药理专业委员会2014年研讨会
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目的:突触核蛋白α-synuclein是帕金森(PD)病人路易小体的主要组成成分,其突变体及三倍体在家族性PD中的发现进一步表明该蛋白与PD发生密切相关.在生理、病理条件下及在实验动物和病人脑中都发现了α-synuclein在胞核的分布,提示α-synuclein在胞核具有重要作用.本实验通过纯化带GFP标签的α-synuclein蛋白及商品化蛋白,利用圆二色谱方法研究α-synuclein与不同DNA序列在体外的相互作用关系.方法:pPIC9Kα-syn-GFP载体转化毕赤酵母诱导表达融合蛋白并进行蛋白纯化及Western Blotting,α-synuclein特异性抗体检测验证;合成DNA单链序列,利用圆二色谱检测α-synuclein与DNA序列的相互作用.结果:成功获得α-syn-GFP融合蛋白并经WB验证;圆二色谱检测到该蛋白更易于同富含AG或TC的序列发生相互作用,与CAAT-box like序列未检测到相互作用,与GC-box like序列能发生相互作用,并且在蛋白与GC like序列比例达到2:1后提高蛋白与DNA序列比值不会再对相互作用产生影响.
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