【摘 要】
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目的:研究Ad-hIL-24对SMMC-7721人肝癌细胞生长的影响及其部分作用机制.方法:将本室构建的Ad-hIL-24经RT-PCR鉴定,转染QBI-293A细胞,多轮感染后获得高效价的病毒.在96孔板上
【机 构】
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苏州大学苏州大学医学院细胞与分子生物学教研室,苏州,215007
【出 处】
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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议
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目的:研究Ad-hIL-24对SMMC-7721人肝癌细胞生长的影响及其部分作用机制.方法:将本室构建的Ad-hIL-24经RT-PCR鉴定,转染QBI-293A细胞,多轮感染后获得高效价的病毒.在96孔板上将生长成单层的SMMC-7721细胞分成三组(NS干预组、5-Fu组和Ad-hIL-24),分别加入PBS、5-Fu(12.5ug/ml)、50MOI Ad-hIL-24各50ul,均为4个复孔,每组观察7天.每隔24h加10ul MTT(5mg/ml),继续培养4h后,加入10％SDS-HCl 100μl/孔,等甲臜完全溶解后用分光光度计测定570nm下的A值,计算肿瘤细胞生长抑制率,绘制肿瘤细胞时间-效应生长曲线,并观察细胞形态变化和生长繁殖状况;流式细胞仪分析细胞周期;Western blot检测caspase3和P53的表达情况.结果:获得理想Ad-hIL-24病毒子.与NS组比较,Ad-hIL-24组明显抑制肿瘤细胞生长(P＜0.01),Ad-hIL-24组与5-Fu组的抑瘤效果相近(P＞0.05);透镜下Ad-hIL-24组的肝癌细胞出现凋亡小体;Western blot证明:Ad-hIL-24组有caspase3蛋白表达,但比5-Fu的条带弱,NS则未见明显表达.结论:Ad-hIL-24显著抑制体外SMMC-7721人肝癌细胞的生长,其机制可能通过caspase3途径、改变BAX/Bcl-2的比值及诱导细胞凋亡而发挥抑瘤作用.
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