【摘 要】
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目的 ：本研究旨在探讨miR-21调控细胞自噬对人退变髓核细胞的影响. 方法：本研究对5例正常的人髓核组织和5例退变的人髓核组织,利用SurePrint Human miRNA 芯片(V16.0)筛选差异性表达的miRNAs,并对48例人髓核组织利用实时定量PCR (qRT-PCR) 对差异性表达的miRNA进行验证.在Lipofectamine 2000转染了miR-21 mimic或miR-2
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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目的 ：本研究旨在探讨miR-21调控细胞自噬对人退变髓核细胞的影响. 方法：本研究对5例正常的人髓核组织和5例退变的人髓核组织,利用SurePrint Human miRNA 芯片(V16.0)筛选差异性表达的miRNAs,并对48例人髓核组织利用实时定量PCR (qRT-PCR) 对差异性表达的miRNA进行验证.在Lipofectamine 2000转染了miR-21 mimic或miR-21 inhibitor的人退变髓核细胞中,利用qRT-PCR和Western blotting技术分析了基质金属降解酶3(MMP-3)、基质金属降解酶9(MMP-9)、Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖表达水平；还利用了Western blotting技术和单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色法观察自噬相关蛋白LC3和SQSTM1/P62水平的影响.此外,本研究还进一步将PTEN的激活剂Tepoxalin、PI3K/Akt的双重抑制剂LY294002、mTOR的抑制剂Rapamycin、PI3K/mTOR的双重抑制剂NVP-BEZ235以及自噬激活剂Trehalose处理细胞后,研究了PTEN/PI3K/Akt/mTOR通路在miR-21调控人退变髓核细胞自噬和细胞外基质分解代谢平衡中的作用.
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