【摘 要】
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目的 研究肠上皮化生形成过程中胆汁酸通过法尼醇X受体(FXR)调控尾型同源盒转录因子-2(CDX2)的机制.方法 免疫组织化学探究FXR和CDX2在正常胃黏膜组织和肠上皮化生组织中
【机 构】
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710032 陕西西安,第四军医大学西京消化病医院消化内科
【出 处】
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The 14th Congress of Gastroenterology China(第十四届全国消化系病学术会议)
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目的 研究肠上皮化生形成过程中胆汁酸通过法尼醇X受体(FXR)调控尾型同源盒转录因子-2(CDX2)的机制.方法 免疫组织化学探究FXR和CDX2在正常胃黏膜组织和肠上皮化生组织中的表达并进行统计学分析；FXR激动剂鹅去氧胆酸(CDCA)、GW4064和拮抗剂Guggulsterone分别作用GES-1细胞和BGC-823细胞,通过免疫印迹法、q-PCR探究CDX2的表达变化；FXR-siRNA转染GES-1细胞和BGC-823细胞后,使用CDCA作用细胞,探究CDX2的表达变化；CDCA、GW4064、Guggulsterone作用GES-1和BGC-823细胞,免疫印迹法和q-PCR探究FXR下游分子核受体SHP、磷酸化P65和P65的表达变化；SHP-siRNA转染GES-1和BGC-823细胞探究CDX2的表达变化；免疫共沉淀探究SHP和P65蛋白之间的直接结合；荧光素酶报告基因探究SHP和NF-κB对CDX2基因上游启动子的调控作用.结果 肠上皮化生组织中FXR、CDX2的表达显著高于正常组织,FXR和CDX2在两种组织中的表达均呈正相关.CDCA、GW4064促进GES-1和BGC-823细胞中CDX2的表达,Guggulsterone则抑制CDX2的表达,但三者均呈浓度依赖性.FXR-siRNA转染GES-1和BGC-823细胞后,FXR表达下调80％,CDCA对CDX2的上调作用减弱.CDCA和GW4064促进SHP、P65、磷酸化P65的表达,Guggulsterone则抑制SHP、P65、磷酸化P65的表达.SHP-siRNA干扰GES-1和BGC-823细胞后,SHP表达下调80％,CDX2表达水平下降.免疫共沉淀示,CDCA作用下SHP与P65以蛋白形式直接结合发生作用.荧光素酶报告基因示,含有SHP和NF-κB的质粒共转染含有CDX2上游启动子序列的细胞后,荧光素酶活性明显上调.结论 胆汁酸通过FXR促进胃黏膜肠上皮化生的发生,其机制可能是通过FXR-SHP-NF-κB通路调控CDX2.
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