【摘 要】
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目的：建立检测博尔纳病病毒(BDV)抗原的双抗体夹心ELISA法,为简单、快速的临床应用提供方法.方法：根据双抗夹心ELISA法基本步骤,分别对BDV p-24小鼠单克隆抗体、BDV p-24兔多克
【机 构】
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遵义医学院第一附属医院,贵州遵义 563003
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目的：建立检测博尔纳病病毒(BDV)抗原的双抗体夹心ELISA法,为简单、快速的临床应用提供方法.方法：根据双抗夹心ELISA法基本步骤,分别对BDV p-24小鼠单克隆抗体、BDV p-24兔多克隆抗体和酶标抗体作多梯度稀释,以确定最佳实验条件,并对其精密度、灵敏度、稳定性、特异性进行初步评价,同期收集病毒性脑炎(VE)患者脑脊液(CSF)44例和神经系统非炎性疾病患者CSF 44例,通过建立的双抗夹心ELISA法检测临床样本中是否存在BDV抗原.结果：BDV p-24小鼠单克隆抗体的最佳稀释度为1∶160,BDV p-24兔多克隆抗体的最佳稀释度为1∶2500,酶标抗体的最佳稀释度为1∶5000,该法的检测灵敏度为170ng/ml,精密度批内差异＜10％,批间差异＜15％,同时具有良好的稳定性与特异性.另外用该法检测临床标本,其中实验组有3例患者检出BDV抗原阳性,阴性对照组均未检出阳性病例.结论：成功建立检测BDV抗原的双抗体夹心ELISA法.
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