【摘 要】
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目的:探索质粒DNA转染骨髓来源DCs的最佳转染条件.方法:在不同条件下(电压、脉冲时间、电转前DCs状态和电转液血清浓度等)转染DCs.用倒置显微镜和流式细胞仪检测DCs转染率.部分细胞在不同条件下转染后48小时,通过台盼兰染色观察细胞活力.结果:电压为250V和脉冲时间为20ms的情况下能够获得最高的转染效率(22％).电转前及时更换细胞培养液能使DCs电转后得到更好的恢复.此外,电转液中的血
【机 构】
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上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科,上海消化外科研究所
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目的:探索质粒DNA转染骨髓来源DCs的最佳转染条件.方法:在不同条件下(电压、脉冲时间、电转前DCs状态和电转液血清浓度等)转染DCs.用倒置显微镜和流式细胞仪检测DCs转染率.部分细胞在不同条件下转染后48小时,通过台盼兰染色观察细胞活力.结果:电压为250V和脉冲时间为20ms的情况下能够获得最高的转染效率(22％).电转前及时更换细胞培养液能使DCs电转后得到更好的恢复.此外,电转液中的血清可能对电转后细胞的活力有益,而温度对电转的影响似乎不大.结论:通过试验,证实质粒DNA通过电转可以有效地转染小鼠骨髓来源的DCs.本试验有助于与小鼠DC转染有关的肿瘤试验研究.
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