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目的:制备和筛选高亲和力和高中和活性的抗EV71病毒的单克隆抗体,并对其特异性和抗原表位进行鉴定。
方法:利用杂交瘤细胞系和有限稀释法挑选阳性克隆,用葡萄球菌A蛋白亲和层析法纯化单抗,并进行抗体的中和效价、交叉反应性以及表位进行分析。
结果:获得阳性细胞克隆5株,筛选出1株抗EV71病毒的单克隆抗体,纯度大于95%,抗体滴度达到10-7,对EV71病毒具有广谱中和特性,与CA16无交叉反应,为VP1特异性,并识别EV71的构象型表位。
结论:筛选出1株具有高亲和力和中和活性的EV71病毒的单克隆抗体,为研制EV71病毒感染性疾病的诊断试剂提供了重要工具,并为研制治疗性单克隆抗体提供了条件。