【摘 要】
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本文用重组PCR技术得到Kininogen D5和TRAIL的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pMAL-c2中,重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导蛋白的表达,得到MBP-KT和MBP-TK,
【机 构】
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第二军医大学生物化学和分子生物学教研室,上海,200433
【出 处】
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第15次全国干扰素及细胞因子学术会议
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本文用重组PCR技术得到Kininogen D5和TRAIL的融合基因,将该DNA片段克隆到原核表达载体pMAL-c2中,重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导蛋白的表达,得到MBP-KT和MBP-TK,经Amylose Resin亲和层析柱层析,得到初步纯化的融合蛋白,活性鉴定可以看出MBP-KT对肿瘤细胞1990有明显的抑制作用,而MBP-TK对肿瘤细胞1990的抑制作用不明显.同时,比较MBP-KT,MBP-TK,MBP-KD5和TRAIL对内皮细胞ECV304的作用,可以看到MBP-KT和MBP-KD5对ECV304有明显的抑制作用且MBP-KT大于MBP-KD5,但是MBP-TK和TRAIL几乎无作用,表明融合蛋白KT既具抗肿瘤作用又有抗新生血管的作用,从而为进一步研究靶向性杀伤肿瘤奠定了基础.
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