本文对鸭α-干扰素基因真核表达质粒(pcDNA-SDIFN-α)的重组大肠杆菌大规模中试生产发酵培养条件、pcDNA-SDIFN-α免疫鸭抗0.5 LD50鸭瘟强毒感染进行系统研究,获如下结果:1.pcDNA-SDIFN-α大规模中试生产发酵培养条件:对pcDNA-SDIFN-α的重组大肠杆菌进行发酵培养条件(温度、pH、溶氧浓度、补料速度、接种量、发酵时间和消泡剂添加量)优化,筛选出了适合DH5α菌株生长的最佳发酵条件为:温度37℃,pH7.4,溶氧含量40％,接种量4％,补料速度80ml/h,发酵时间18h,消泡剂添加量0.02％,此条件下,pcDNA-SDIFN-α质粒含量可达到357mg/L。2.pcDNA-SDIFN-α疫鸭抗0.5LD50鸭瘟强毒感染:将pcDNA-SDIFN-α分别按每1μg、3μg和6μg三个剂量基因枪轰击免疫北京鸭,以PBS、空载体质粒pcDNA 3.1(+)和鸭瘟弱毒疫苗为对照,免疫15 d后分经皮下注射人工感染0.5LD50鸭瘟强毒(含病毒DNA拷贝数为3.524x104),统计发病死亡情况,并于攻毒后2 h、6 h、12 h、24 h、3d、6d、9d、14d,22d,26d、33d和40d采全血,采用实时荧光定量PCR对鸭瘟病毒在鸭外周血中含量的动态变化进行检测。结果:pcDNA.SDIFN-α基因枪免疫组鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量比PBS和空载体对照组低,差异显著,在3d前都低于弱毒疫苗免疫组,差异不显著。三个剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组之间外周血鸭瘟病毒DNA含量差异不显著,攻毒初期(2h),6μg免疫鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量最低,3μg次之,1μg最高.基因枪1 μg免疫皮下攻毒组有3/9只鸭死亡,滴鼻攻毒组有3/9只鸭死亡；基因枪3 μg免疫滴鼻攻毒组有3/9只鸭死亡；PBS和空载体免疫组分别有13/27和10/27只死亡,基因枪6μg免疫鸭以及鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭获得100％保护。病死鸭的脾脏、十二指肠、空肠、盲肠和直肠是鸭瘟病毒DNA含量较高的组织器官。研究表明,基因枪轰击和肌肉注射pcDNA-SDIFN-α免疫鸭后能产生一定的抗鸭瘟强毒感染的作用,并表现出一定的量效关系。