为了解河北省苜蓿根腐病的发病情况和病原种类,在2015年对河北省黄骅市和宣化县部分苜蓿种植地进行了苜蓿根腐病发病情况调查。调查结果表明,在大多数苜蓿种植地块该病害呈零星发生状态,个别地块病株率为2%~3%。对调查中采集的苜蓿根腐病植株样品,采用常规组织分离方法进行了微生物分离、纯化和培养,共获得105个菌株。采用CTAB法提取菌株DNA,选取引物ITS4/ITS5和延伸因子EF-1H/EF-2T进行PCR扩增,并对扩增产物进行测序,经BLAST序列比对,结果表明,所分离微生物共有17种,除拟茎点霉(Phomopsis spp.)、间座壳菌(Diaporthe spp.)、木霉菌(Trichoderma spp.)、淡色丛赤壳(Bionectria ochroleuca)等外,还有65株为镰孢菌(Fusarium spp.),包括22株木贼镰孢(F.equiseti)、21株茄镰孢(F.solani)、16株尖孢镰孢(F.oxysporum)、3株锐顶镰孢(F.acuminatum)、1株层出镰孢(F.proliferatum)、1株芳香镰孢(F.redolens)和1株F.commune。采用培养皿法对获得的镰孢菌各个菌株进行了致病性测定,结果表明,多数镰孢菌对萌发的苜蓿种子具有致病性,但致病性强弱有差异。除部分木贼镰孢菌株致病性较弱外,大多数镰孢菌菌株对苜蓿幼苗表现出强致病性,其中,木贼镰孢菌株QZ3、锐顶镰孢菌株N12-1、尖孢镰孢菌株QD13-2的致病性最强,其病情指数分别为90.83、82.92、77.13。本研究利用分子生物学技术进行了河北省部分地区苜蓿根腐病病原的鉴定,并对所分离获得的镰孢菌致病性强弱进行了测定,这为了解苜蓿根腐病病原和该病害的及时防治提供了一定基础。