【摘 要】
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物种遗传多样性的研究是物种保护措施的基础、理论依据.本研究以滇中地区山茶属的4个滇山茶品种的DNA为实验材料,利用内部简单重复序列多态性(ISSR)分子标记技术对其PCR反应体系进行建立和优化.通过四因素(Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶量)三水平正交设计出9组不同的反应体系,对DNA扩增效果、稳定性进行评价,实验结果表明:采用Mg2+浓度3mmo/L,dNTPs浓度0.3mm
【机 构】
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西南林业大学园林学院,昆明650224
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物种遗传多样性的研究是物种保护措施的基础、理论依据.本研究以滇中地区山茶属的4个滇山茶品种的DNA为实验材料,利用内部简单重复序列多态性(ISSR)分子标记技术对其PCR反应体系进行建立和优化.通过四因素(Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq聚合酶量)三水平正交设计出9组不同的反应体系,对DNA扩增效果、稳定性进行评价,实验结果表明:采用Mg2+浓度3mmo/L,dNTPs浓度0.3mmol/L,引物浓度0.6μmol/L,Taq聚合酶0.6U/10μl组建的反应体系扩增效果最好,ISSR-PCR反应体系稳定,非特异性产物极少,反应产物稳定,条带清晰,无拖尾,且多态率较高.
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