【摘 要】
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目的:通过比较不同转移能力乳腺癌细胞系中磷酸化ERK1/2蛋白的差异,研究高转移倾向乳腺癌细胞系(LM-MCF-7)中高磷酸化的ERK对细胞增殖和迁移的作用及其信号转导途径.方法:应
【机 构】
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南开大学生命科学学院,天津,300071
【出 处】
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2006’亚太地区国际肿瘤生物学和医学会议\\首届中国中青年肿瘤专家论坛暨全国肿瘤综合诊疗新进展研讨会
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目的:通过比较不同转移能力乳腺癌细胞系中磷酸化ERK1/2蛋白的差异,研究高转移倾向乳腺癌细胞系(LM-MCF-7)中高磷酸化的ERK对细胞增殖和迁移的作用及其信号转导途径.方法:应用免疫印迹方法检测在乳腺癌MCF-7和LM-MCF-7细胞系中MAPK家族的p-ERK1/2、p-p38和p-JNK的水平;采用ERK特异性抑制剂PD98059作用于具有高p-ERK水平的LM-MCF-7细胞后,应用流式细胞术和"伤口愈合"实验检测ERK抑制前后细胞增殖和迁移的变化,并用免疫印迹方法检测ERK与细胞增殖和迁移等相关因子表达的关系,采用免疫荧光染色方法检测ERK途径抑制对β-catenin蛋白细胞定位的影响.将克隆了survivin基因的质粒pcDNA3-Sur转染MCF-7细胞,应用"伤口愈合"实验检测细胞增殖和迁移的变化.结果:LM-MCF-7中ERK磷酸化水平明显增强,与MCF-7细胞相比其增殖和迁移作用明显增强,并可被ERK抑制剂PD98059所拮抗;LM-MCF-7与MCF-7细胞相比,β-catenin、cyclinD1、survivin、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达水平明显增高,可被PD98059所拮抗;同时,PD98059可抑制β-catenin在LM-MCF-7细胞核中的高表达;当survivin过表达后MCF-7细胞增殖和迁移加快.结论:LM-MCF-7细胞中活化的ERK1/2水平明显增高,活化的ERK1/2水平增高是导致细胞增殖和迁移功能增强的重要原因,其信号转导途径与ERK1/2-MLCK-p-MLC、ERK1/2-Survivin和ERK1/2-β-catenin-cyclinD1等有密切的关系.
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