脂多糖和热打击联合作用对人肠上皮细胞释放细胞因子的影响

来源 :全军生物医药博士后论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangyuan1984
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:观察脂多糖(LPS)与热打击单独和联合作用对人肠上皮细胞释放细胞因子的诱导作用。 方法:培养人肠上皮细胞株(SW480),分别用不同浓度的LPS(0,0.01,0.1,1,10μg/ml)刺激培养的SW480细胞,24 h后收集细胞上清;将培养的SW480细胞置于42℃孵箱中1h进行热打击,再将细胞重新置于标准37℃、5%CO2培养箱中继续培养,分别于1 h和24 h后收集细胞上清;将上述收集的细胞上清用LiquiChip液相蛋白芯片系统检测上清中10种细胞因子/趋化因子的表达分泌水平,这10种因子分别为粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α);最后,将细胞进行热打击(42℃,1h)后,用不同浓度的LPS刺激培养的细胞,并于24 h后收集细胞上清,用LiquiChip液相蛋白芯片系统检测培养细胞上清中上述10种细胞因子/趋化因子的表达分泌水平。 结果:LPS可以以剂量依赖性的方式诱导SW480表达分泌IL-8,而对GM-CSF、IFN-γ、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α等作用不明显;热打击1 h即可诱导SW480细胞表达分泌IL-8的水平升高,但与对照相比无统计学差异(P>0.05),但至24 h后IL-8的水平可以明显升高(P<0.01)。同样,热打击对SW480细胞的其余9种炎症因子的表达分泌无明显诱导作用。 有意思的是,热打击和低浓度的LPS联合刺激诱导SW480细胞表达分泌IL-8有一定的协同效应,但与单独LPS作用相比无明显统计学差异(P>0.05);但热打击可明显降低高浓度LPS对SW480细胞的IL-8表达分泌水平,统计学有显著性差异。 结论:作为脏器实质细胞,人肠上皮细胞SW480对炎性刺激仅能产生单一种类的细胞因子,其中LPS作用可以上调IL-8细胞因子的水平,一定强度的热打击同样可以诱导人肠上皮细胞分泌表达IL-8,但却可以一定程度上抑制高浓度LPS对SW480细胞的IL-8表达分泌水平,这为理解重症中暑至多脏器功能衰竭(MODS)发生发展过程中,肠屏障细胞的炎性反应在肠道细菌和内毒素移位中的作用机制提供了一定的实验依据。而至于热打击可诱导肠上皮细胞对内毒素刺激的耐受性增加,是否作为一种热适应从而扮演有保护作用的角色值得进一步研究。
其他文献
目的:高通量地筛选人卵巢癌相关的自然反义转录子,为深入研究自然反义转录子在卵巢癌发生、发展中的作用奠定基础。方法:以人正常卵巢组织和卵巢癌组织为材料,用RNase Ⅰ保护分析法分离出2种组织中的正-反义转录子双链RNA,经转录后用抑制性消减杂交特异性扩增2种组织间的差异片段,最后对差异片段克隆、测序。结果与结论:分离出的2种组织的正-反义转录子经克隆和鉴定后,共获得20个测序结果,其中有3个分子与
目的:卡波西样血管内皮瘤(Kaporsiform hemangioendothelioma,KHE)是一种罕见的内皮源性交界性肿瘤,部分KHE伴有严重血小板减少、继发性纤维蛋白原和凝血因子消耗等表现,称为卡梅现象(KasabachMerritt phenomenon,KMP)。本文旨在观察KHE的病理特征、超微结构和相关抗原的表达,探讨KMP的发生机制和抗原表达的意义。方法:回顾性分析和前瞻性收集
人们对间充质干细胞(MSC)在早期胚胎的发育规律及迁移特性知之甚少,由于小鼠MSC分离和培养困难,对其了解更少。我们通过优化培养和诱导分化条件,从E11.5小鼠胚胎DA(dorsal aorta)分离得到真正的MSC,简称为DA-MSC,具有均一的免疫表型(CD31-F1k1-CD45-CD34-CD11b-F14/80-CD44+CD29+CD105+Scal+),表达周细胞的标记(α-SMA+
目的:对基于量子点(QD655)标记抗核抗体(ANA)间接免疫荧光(IIFA)检测与细胞成像效果进行评价。方法:以HEp-2细胞为实验基质片,CdSe/ZnS量子点标记二抗,采用IIFA对ANA进行检测,记录不同ANA阳性血清产生的免疫荧光模式,单特异性ANA同时用免疫印迹法确认,并与FTTC标记检测结果进行对比分析。结果:QD655标记荧光优先与细胞浆内抗原-抗体反应,对间期细胞核仁、着丝点与核
目的:国内外大量流行病学资料表明,同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)与慢性神经退行性疾病的发生、发展及预后存在密切联系。但Hcy对神经细胞的具体作用及机制仍不明确,本研究通过离体实验观察Hcy对海马神经细胞的损伤作用、引起海马神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的情况,探讨Hcy导致海马神经细胞凋亡的相关机制;同时观察甲基供体S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethionine,SAM
目的:对于不可切除且不适合经动脉治疗的肝癌患者,联合药物化疗是唯一选择,然而迄今它还未能提供持久的病情缓解。为肝癌化疗寻找新的药物组合具有重大的现实意义。阿霉素和紫杉醇联合在乳腺癌治疗中展示了良好的前景。本研究检测阿霉素和紫杉醇联合对人肝癌HepG2和Huh7细胞以及荷H22小鼠的协同作用。方法:药物处理后,相差显微镜拍照研究2种肿瘤细胞的形态变化;MTT法检测相对存活细胞数量;流式细胞仪分析细胞
本文报道了新型p38细胞分裂素活化蛋白激酶抑制剂-1-(3-特丁基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)-3-(5-(2-吗啉乙氧基)-2H-色烯-8-基)脲的高效合成方法。应用芳基丙炔醚的克莱森热重排反应构建色烯母核,并且初步探讨了溶剂效应对所生成的两个异构体,即2H-色烯和2-甲基苯并呋喃比率的影响。
糖尿病(diabetes mellitus)是继肿瘤、心血管疾病之后的第三大严重的慢性非传染性疾病,我国已成为仅次于印度的世界第二大糖尿病国家。传统治疗Ⅱ型糖尿病的磺酰脉类和双胍类口服降糖药疗效有限,无法根本阻止胰岛b细胞的坏死和胰岛素抵抗,因此新型糖尿病治疗药物的研究一直是国际上该领域研究的热点。上世纪末以过氧化物酶体增殖因子活化受体(peroxisome proliferator-active
肿瘤多药耐药是肿瘤临床治疗过程中一个亟待解决的难题,临床上至今尚未有有效防止和逆转肿瘤多药耐药的方法。为了深入探讨其发生机制,本研究建立了紫杉醇诱导的多药耐药肿瘤细胞系CCRF-CEM/Taxol和A549/Taxol,并以CCRF-CEM/Taxol细胞为研究对象,考察了紫杉醇诱导的多药耐药肿瘤细胞的细胞周期时程、多药耐药相关蛋白P-gp、MRP1、LRP等表达水平的变化特点。研究结果表明,紫杉
目的:探讨骨髓间充质干细胞在早期重症急性胰腺炎并发多脏器功能障碍综合征中的作用。方法:将50只体重180~220 g Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠随机分为5组,每组10只。A组为正常对照组,不作任何处理;B组为L-精氨酸致早期重度胰腺炎(ESAP)模型组;C组为自体骨髓回输对照组,造模后1d用核染料Hoechst33258标记自体骨髓间充质干细胞(MSC),并回输到自体骨髓腔,其余