【摘 要】
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采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从日本鳗鲡(Anguillajaponica)头肾组织、性腺和脑垂体总RNA中扩增出编码一氧化氮合酶(Nitricoxidesynthase,NOS)钙调蛋白(CaM)结合区基因cDNA片段,克隆至大肠杆菌DH5α中.测定结果表明,编码鳗鲡nNOS的钙调蛋白结合区碱基与哺乳类动物、其它鱼类的同源性分别为:82﹪～88﹪、85﹪～93﹪;推测的氨基酸序
【机 构】
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中国水产科学研究院,珠江水产研究所,广东,广州,510380;中山大学,水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物重点实验室,广东,广州,510275
【出 处】
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国家“863”计划资源环境技术领域第三届海洋生物高技术论坛
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采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从日本鳗鲡(Anguillajaponica)头肾组织、性腺和脑垂体总RNA中扩增出编码一氧化氮合酶(Nitricoxidesynthase,NOS)钙调蛋白(CaM)结合区基因cDNA片段,克隆至大肠杆菌DH5α中.测定结果表明,编码鳗鲡nNOS的钙调蛋白结合区碱基与哺乳类动物、其它鱼类的同源性分别为:82﹪～88﹪、85﹪～93﹪;推测的氨基酸序列与哺乳类动物、其它鱼类同源性分别为:92﹪～95﹪、93﹪～99﹪.对推导出的鳗鲡nNOSCaM结合区进行疏水性和同源性分析结果表明,与哺乳动物有非常高的相似性.在此基础上,利用试剂盒测定了将日本鳗鲡暴露于浓度为30μg/L的镉溶液中2周后,一氧化氮(NO)和钙调蛋白的变化情况,结果表明,镉竞争性抑制了体内钙与CaM的结合,降低了一氧化氮合酶的活性,降低了NO的产生.
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