从PI3K/Akt信号通路研究噎膈血瘀证患者血清对食管癌细胞的干预机制--噎膈血瘀证候分子诊断学研究

来源 :中华中医药学会中医诊断学分会第十五次中医诊断学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tonycheungqd
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目的:通过观察血瘀型噎膈患者血清对食管癌EC9706细胞增殖、形态变化及PI3K/Akt介导的信号通路蛋白表达的影响,探讨食管癌瘀血内结证形成的分子机制. 方法:将EC9706细胞于37℃,5%饱和湿度的CO2培养箱孵育24h,饥饿24h,分别加入倍比梯度的血瘀证、脾气虚证患者和健康人血清,MTT染色法检测细胞增殖变化;光镜下观察各组间细胞形态差异; western blotting法检测PI3K/Akt信号通路蛋白表达的差异. 结果:血瘀型噎膈患者血清刺激细胞的50%增殖率为711 u 1/10ml培养液体积,光镜观察,血清刺激细胞呈长梭形改变,细胞连接成网状,与脾气虚证患者、健康人血清干预的细胞有显著性差异;在PI3K/Akt信号通路中,血瘀型噎膈患者血清组对EC9706细胞蛋白EGFR、PI3K、Akt、p-Akt和NF-κB的表达具有特征性促表达作用,与其他各血清干预的细胞比较有显著性差异(P<0.05). 结论:膈血瘀证患者血清提供癌细胞增殖有利环境,噎膈血瘀证候形成的分子机制与PI3K/Akt信号通路蛋白超标达密切相关.
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