【摘 要】
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目的 采用脉络丛上皮细胞系Z310细胞,构建四环素(tetracycline,Tet)可诱导铜转运体1(CTR1)高表达细胞株iZCTR1,验证该模型在血-脑脊液屏障通透性、以及铜离子跨屏障转运
【机 构】
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第四军医大学军事预防医学院劳动与环境卫生学教研室,西安710032
【出 处】
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中国毒理学会第四届中青年学者科技论坛
论文部分内容阅读
目的 采用脉络丛上皮细胞系Z310细胞,构建四环素(tetracycline,Tet)可诱导铜转运体1(CTR1)高表达细胞株iZCTR1,验证该模型在血-脑脊液屏障通透性、以及铜离子跨屏障转运研究中的作用和可靠性,并利用该模型研究铅诱导脉络丛铜代谢紊乱的机制.方法 大鼠脉络丛上皮细胞系Z310体外培养,采用Invitrogen公司T-REx?系统,将调控质粒和插入CTR1基因的表达质粒转染进入细胞,经稳定筛选后,得到Tet诱导CTR1高表达的细胞株iZCTR1.免疫荧光法检测细胞紧密连接蛋白的表达和分布;Transwdl实验检测细胞对大分子的通透性以及铜离子的跨膜转运.在铅染毒实验中,64Cu吸收实验检测细胞铜吸收量;siRNA干涉技术观察CTR1在细胞铜吸收中的作用.
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