【摘 要】
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目的 观察金丝桃素对体外培养的弓形虫RH 株速殖子的杀伤作用,探讨金丝桃素抗弓形虫的效果及杀虫机制.方法 将实验按药物(金丝桃素)浓度分为四组,即生理盐水组为A 组即对照组、药物浓度为5ug/ml、50ug/ml、500ug/ml 各为B 组、C 组和D 组,分别置入到(含弓形虫速殖子1×106个/ml)的24 孔培养板中,于2h、4h、6h 收集虫体,用台盼蓝染色法检测弓形虫速殖子着色率;吉姆萨
【机 构】
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蚌埠医学院病原生物学教研室,安徽省感染与免疫重点实验室,蚌埠 233030 安徽医科大学病原生物学
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目的 观察金丝桃素对体外培养的弓形虫RH 株速殖子的杀伤作用,探讨金丝桃素抗弓形虫的效果及杀虫机制.方法 将实验按药物(金丝桃素)浓度分为四组,即生理盐水组为A 组即对照组、药物浓度为5ug/ml、50ug/ml、500ug/ml 各为B 组、C 组和D 组,分别置入到(含弓形虫速殖子1×106个/ml)的24 孔培养板中,于2h、4h、6h 收集虫体,用台盼蓝染色法检测弓形虫速殖子着色率;吉姆萨染色法观察其形态和结构变化,透射电镜观察虫体超微结构,流式细胞仪检测虫体的存活状态.结果 速殖子经不同浓度金丝桃素(5ug/ml、50ug/ml、500ug/ml)作用后,B 组、C组和D 组的台盼蓝着色率在2h 分别为(11.00±3.60)%、(25.00±6.25)%和(40.00±2.65)%,D组着色率显著高于C 组和B 组(P<0.01),各组均高于A 组(6.00±3.00)%,但B 组和A 组之间无明显差异;作用4h后,D组着色率(97.00±2.00)%显著高于C 组(30.00±7.21)%、B组(20.00±3.00)%和A 组(10.00±1.00)%(P<0.01);6h 后,D 组着色率(98.00±1.73)%亦高于C 组(42.67±5.50)%、B 组(34.00±6.56)%和A 组(19.33±4.93)%,且各组之间均有显著性差异(P<0.01).Giemsa染色观察,随时间的延长及剂量的增加,弓形虫两端逐渐变圆、肿胀、坏死;透射电镜观察随时间延长,速殖子逐渐出现肿胀,胞膜与基质之间有明显空隙,虫体内空泡变多变大,胞膜破裂,内部结构溶解;流式细胞仪检测结果表明:弓形虫存活率在药物作用后的各时间段内与对照组相比差异显著(P<0.01);药物作用2h后,C 组弓形虫存活率(7.91±1.86)%显著低于B 组(38.10±5.47)%和A组(81.84±6.02)%(P<0.01);4h和6h后,B组弓形虫存活率分别为(14.32±7.89)%和(1.37±1.76)%明显低于A 组(73.80±11.33)%和(64.11±14.37)%(P<0.01);C 组在4h 后达到最低值,D 组则在2h 即达到最低值.结论 金丝桃素具有显著的体外抗弓形虫效应,效果与时间和剂量呈依赖关系.
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