表达虎源H5N1亚型禽流感病毒NP蛋白重组犬2型腺病毒的构建及鉴定

来源 :四川省畜牧兽医学会2010年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shall202
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  将A/Tiger/Harbin/132/2007(HSN1)的NP基因克隆入pVAX1载体中,然后将含有NP基因的表达盒(CMV+NP+P0lyA)克隆入pVAXE3的Ssp I酶切缺失处,获得含有NP表达盒的穿梭载体pVAXAE3-NP。用Sal I+Nru 1分别对pVAXAE3-NP和pPoly-2-CAV2进行双酶切,将含有NP表达盒的片段定向克隆入pPoly2-CAV2,获得在E3区缺失处插入NP表达盒的重组质粒pCAV-2-NP。释 CAV-2-NP重组基因组,脂质体介导转染DK细胞,获得了能使DK细胞产生典型的腺病毒样细胞病变的CAV-2-NP重组病毒。从形态学、基因组水平、NP基因的转录、NP蛋白的表达以及重组病毒的生长特征等方面进行了鉴定。结果表明,CAV-2-NP具有典型的CAV-2形态特征,CAV-2-NP在繁殖的过程中没有对H5N1 NP表达盒片段进行缺失或重排。并且能够转录H5N1NP的mRNA,ELISA和免疫荧光分析表明重组表达产物可被流感病毒NP单克隆抗体1G6G4所识别。
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试验采用单因子设计,选用年龄、体重(345±22kg)相近、健康无病的西门塔尔杂交牛(西门塔尔×本地黄牛)24头,随机分成4组,饲喂不同日粮(精料与白酒糟的干物质比例分别为1:1、1:1.5、1:2.5、1:3.5;青干草饲喂量各处理均相同)。本文旨在研究精料与白酒糟的不同比例对夏季架子牛生产性能及血液生化指标的影响。试验结果表明:试验全期舍内温湿度指数最低为72.18,试牛处于高湿热应激环境;试
本试验选择1~15岁的60头九龙牦牛作为试验组,同龄50头牦牛作为对照组,试验组采用白天放牧+晚上补饲配制精料的方式开展补饲试验,对照组只开展放牧,不补饲。试验期2009年3月10日至6月10日。试验开始时及开始后30d和90d分别测量体尺和体重。结果表明,在试验不同阶段,同龄牦牛身高、体斜长和胸围等体尺指标在补饲组和对照组间无显著差异(P>0.05),但补饲第90d,试验组不同年龄牦牛体重均已出
四川是我国最大的肉兔生产和消费地区,肉兔是草食小家畜,需要大量的粗饲料资源但是四川粗饲料资源严重缺乏,特别是优质苜蓿草粉,需要从北方调进,长距离的运输费用,使得四川兔饲料价格长期居高不下,严重制约了养兔经济效益的提高。四川是我国重要的粮食产区,农副产品资源丰富,尤其秸秆和糟类等粗饲料资源,但是四川省这些粗饲料资源存在“数量大、种类多、比较分散”的特点,营养价值未评定,资源不仅未得到合理开发利用,还
为开发一种高效免疫调节分子提高猪对猪繁殖和呼吸综合症(PRRS,蓝耳病)的抵抗力,本研究探讨IL-4和IL-6的融合基因(PIL4/IL6)对于猪蓝耳病疫苗免疫效应的影响。重组真核表达质粒PIL4/IL6用以阳离子凝胶法制备的壳聚糖CNP进行包裹,形成VPIL4/IL6-CNP,肌注21日龄接种过灭活蓝耳病疫苗的仔猪。实验分4组,分别是肌肉注射0.5mg PIL4/IL6-CNP、VPIL4+VP
用商品化禽流感(H5+H9)二价灭活苗免疫动物园圈养的15种珍禽,分别于免疫前及免疫后14d、21d、35d采血检测血清中H5和H9亚型禽流感血凝抑制(H1)抗体,观察家禽用禽流感(H5+H9)二价灭活苗对珍禽的免疫效果。试验结果表明:珍禽免疫禽流感(H5+H9)二价灭活苗是安全的,大多数品种能够产生H5和H9亚型禽流感HI抗体,但不同品种、不同个体的珍禽产生的HI抗体滴度有差异。从群体来看,H5
目的:检测禽传染性支气管炎病毒(IBV)急性感染SPF鸡后病毒在体内的分布。方法:本研究建立了使用GAPDH和uB作为内参的禽传染性支气管炎荧光定量PCR方法(real—time PCR);用IBV标准毒株M41株对SPF鸡进行急性感染,从攻毒后第1,4,7,10,14,21,28,35天检测脑、气管、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、腺胃、肌胃、盲肠扁桃体和法氏囊的病毒载量,对急性感染后的体内
用禽流感(H5+H9)二价灭活疫苗对大恒优质肉鸡进行免疫,监测免疫后鸡群的抗体效价,研究其变化规律,探讨种鸡禽流感免疫的间隔时间。结果表明,产蛋期鸡群间隔90~120天进行种鸡的禽流感加强免疫,能产生较高的抗体效价。
[目的]研究蛋鸡MHC(Major Histocompatibility Complex,主要组织相容性复合物)基因对不同周龄和不同部位肠道细菌种群结构的影响。[方法]使用基于16S rDNA的PCR—DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术,结合特异性和共性条带割胶回收DNA进行克隆和测序,对2,4,6和8周龄商品蛋鸡和15I,系蛋鸡嗉囊、十二指肠、空肠、回肠和盲肠内含物细菌群落的结构和多样性进行比较,
为了分离对产气荚膜梭菌具有拮抗作用的鸡源乳酸杆菌,在产气荚膜梭菌压力下,从健康草科鸡嗉囔、空肠、回肠和盲肠内容物中分离到5株乳酸杆菌,通过耐酸、耐胆盐和耐热试验,筛选到2株(S。和H:)耐受性较好的乳酸杆菌,再运用双层琼脂法检测这2株乳酸杆菌对产气荚膜梭菌的拮抗效果,发现乳酸杆菌H2具有很好抑菌性能,其体外抑菌成分主要是酸性依赖物质。