【摘 要】
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目的 建立分离、培养人循环成纤维细胞的方法,研究其细胞生物学特征和功能.方法 取成人外周血白细胞,经1.077 g/ml的淋巴细胞分离液分离,接种于含20％胎牛血清的DMEM培养液中进
【机 构】
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北京中医药大学组织学与胚胎学教研室,北京,100029
【出 处】
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第八届全国中西医结合实验医学研讨会
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目的 建立分离、培养人循环成纤维细胞的方法,研究其细胞生物学特征和功能.方法 取成人外周血白细胞,经1.077 g/ml的淋巴细胞分离液分离,接种于含20％胎牛血清的DMEM培养液中进行培养.对贴壁生长的成纤维样细胞进行免疫组织化学鉴定、流式细胞仪分析和电镜观察,并通过测定培养液中羟脯氨酸含量研究其胶原合成能力.结果 培养9天后循环成纤维细胞分子标记CD34、CD45、COL Ⅰ阳性,其中COL Ⅰ阳性细胞含量为83.5％;电镜下观察具有典型的成纤维细胞特征;培养液中羟脯氨酸含量为11.17 μg/ml,明显高于空白对照组8.07 μg/m1,P＜0.01,表明培养细胞具有较强的胶原合成能力.结论 成人外周血中存在成纤维细胞的前体细胞,经体外分离、培养可分化为循环成纤维细胞.
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