目的：体外培养正常人颊粘膜成纤维细胞,建立口腔粘膜固有层模型,为进一步研究提供实验基础；为进一步研究细胞因子对颊粘膜成纤维细胞的调控作用提供实验条件。方法：采用组织块法原代培养人颊粘膜成纤维细胞,经胰蛋白酶消化进行传代培养,辅以差速贴壁法分离纯化人颊粘膜成纤维细胞,MTT法绘制细胞生长曲线,并进行形态学和免疫组织化学法鉴定,建立稳定的体外细胞模型。结果：原代培养的人颊粘膜成纤维细胞,经传代培养,分离纯化,第四代细胞形态良好,活力旺盛,倒置显微镜下观察细胞形态呈长梭形或星形,胞浆丰满,胞核呈椭圆形,位于胞体中央。细胞交织成网状或束状。细胞呈典型的成纤维细胞形态,排列紧密有极性,生长呈放射状或漩涡状。免疫组织化学法显示细胞抗波形蛋白染色呈阳性,抗角蛋白染色阴性,为中胚层来源的成纤维细胞。结论：体外培养的细胞符合正常人颊粘膜成纤维细胞的形态学及免疫组织学特征,与正常人颊粘膜固有层结构相似,可为后续实验做体外细胞模型,为研究细胞因子对其功能的调控作用奠定基础。人颊粘膜成纤维细胞易于培养,增殖力强,取材简单,为体外构建组织工程口腔粘膜固有层及临床修复缺损提供实验依据。