重组细胞色素P450 BM-3的表达及初步纯化研究*

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对重组细胞色素P450 BM-3基因工程菌的培养条件进行了单因素优化,确定了较佳的培养条件:接种量1%,装液量100mL/500mL,发酵培养基加入0.1mg/L FeCl3,OD578达到1.0左右时升温至42℃诱导,诱导时间为5小时。用Resource Q阴离子层析介质对菌体破胞液进行了初步的纯化,通过AKTA explorer100对其分离条件进行了优化,结果表明:0.3mol/L、0.5mol/L的两步NaCl阶跃洗脱,目标蛋白纯度较高,活性收率为30.1%,纯化倍数为2.12。
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