目的:研究局部应用胰岛素对小鼠全厚皮肤切除创面的作用及对人表皮细胞株HaCaT细胞迁移的影响,探讨参与这一生物学过程的信号转导途径。方法:在C57BL/6J小鼠背部造成7mm直径全厚皮肤切除创面,创面分别给予20ul生理盐水或0.03u胰岛素直至愈合,记录创面愈合时间和伤后不同时相创面愈合百分率,观察伤后三天表皮迁移长度。体外细胞培养系统中观察胰岛素对人表皮细胞株—HaCaT细胞迁移的作用。免疫蛋白印迹法检测胰岛素处理后HaCaT细胞磷酸化AKt激酶和胞外蛋白激酶ERK水平;pull-down测定和免疫荧光法观察及测定活化的小分子GTP酶Rac1的表达;以PI3K和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂LY294002和U0126处理细胞以明确PI3K、ERK和Rac1活化在胰岛素诱导的表皮角质形成细胞的迁移中的作用。结果:胰岛素促进小鼠全厚皮肤切除创面边缘表皮角质形成细胞迁移从而促进创面再上皮化;以时间和剂量依赖方式促进HaCaT细胞迁移;胰岛素作用后磷酸化AKt与ERK水平明显升高;抑制AKt和ERK可阻断胰岛素诱导的HaCaT细胞迁移;小分子GTP酶Rac1的活化可被AKt抑制剂所抑制,抑制ERK不对Rac1的活化产生明显作用。结论:胰岛素促进表皮角质细胞的迁移从而促进创面再上皮化,PI3K-Akt和ERK均与胰岛素加速的表皮角质细胞迁移有关,PI3K-Akt可进一步活化Rac1参与胰岛素对表皮细胞迁移的调控。