基于“三明治培养”大鼠原代肝细胞模型的代谢组学应用于药源性肝损伤的机制研究及早期发现

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<正>目的:利用代谢组学技术结合"三明治培养"大鼠原代肝细胞模型进行药物诱发的胆汁淤积型肝损伤机制研究及早期发现。方法:1.三明治培养模型的构建及评价。将单层原代肝细胞夹在鼠尾胶原和matrigel之间形成三明治构型(SCRH)。SCRH培养5天后形成胆小管,加入荧光胆酸类似物CLF孵育,测定CLF在细胞和胆小管中的蓄积量,计算胆汁排泄指数(BEI)。2,细胞毒性实验。将SCRH与5-120μM的ANIT(1-萘异硫氰酸酯)共孵育24h及48h,测定细胞内ATP水平,指示细胞活性。
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