本研究采用海藻酸钠和壳聚糖复配作为载体固定化碱性蛋白酶,并对固定化酶的酶学性质进行研究.海藻酸钠和壳聚糖,容易获得,安全,无毒,是常用的固定化载体.本试验通过单因素试验和响应面试验分析方法对海藻酸钠与壳聚糖配比、固定化pH、固定化温度、固定化时间以及碱性蛋白酶添加量进行优化,得到最佳固定化条件为海藻酸钠与壳聚糖质量比为2∶1,固定化pH9.5,固定化温度50℃,固定化2h,碱性蛋白酶添加量8000 U/g,所得的固定化碱性蛋白酶酶活可达5640U/g.同时进一步对固定化酶的最佳温度、pH、热力学稳定性、操作稳定性进行了研究,结果显示固定化酶的最适pH为10,最适温度为55℃,制得的固定化酶的热力学稳定性和操作稳定性较好.此外,固定化酶重复利用5个循环后酶活力仅降低40％.本实验得到的固定化酶性质稳定,说明本方法可行,是一种较好的固定化碱性蛋白酶的方法.