鹿源牛分支杆菌ESAT-6/Ag85B/Mtb8.4基因牛IL-2基因融合疫原性研究

来源 :首届中国鹿业发展大会暨中国畜牧业协会鹿业分会成立大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:seanstarseanstar
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本研究拟制备牛IL-2与鹿源牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因的融合蛋白.从患结核病鹿的肺组织中粗分离牛分支杆菌并提取基因组DNA,PCR扩增牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;提取牛淋巴细胞,经总RNA提取、RT-PCR得到了IL-2基因片段.经测序鉴定后,将4个目的片段重组,构建原核表达载体,并对表达的融合蛋白进行鉴定.克隆出了牛IL-2,以及鹿源牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4基因;构建了原核表达载体pME290-SDCZ,并表达出了融合蛋白;Western印迹结果证实该重组蛋白能与抗牛分支杆菌多克隆抗体发生特异免疫结合反应.制备了牛IL-2与鹿源牛分支杆菌ESAT-6、Ag85B和Mtb8.4融合蛋白,本研究为下一步研制重组鹿结核亚单位疫苗奠定了基础.
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