【摘 要】
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目的:研究内向整流型钾离子通道基因Kir4.1在Cx30基因敲除小鼠不同生长发育期内耳的表达变化,明确Cx30敲除对内耳Kir4.1基因表达的调节和影响,以探讨Cx30基因敲除致聋的病理机制。 方法:将实验动物(CBA/Caj小鼠)按基因型分为Cx30基因敲除组和野生型对照组,分离提取出生后不同发育时期的耳蜗组织标本,采用实时荧光定量PCR (realtime PCR)技术,从转录水平比较各时期
【机 构】
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解放军总医院附属第一医院耳鼻喉科,北京,100037;美国肯塔基大学医学中心,肯塔基州,40536
【出 处】
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第十四届全军耳鼻咽喉头颈外科学术大会
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目的:研究内向整流型钾离子通道基因Kir4.1在Cx30基因敲除小鼠不同生长发育期内耳的表达变化,明确Cx30敲除对内耳Kir4.1基因表达的调节和影响,以探讨Cx30基因敲除致聋的病理机制。
方法:将实验动物(CBA/Caj小鼠)按基因型分为Cx30基因敲除组和野生型对照组,分离提取出生后不同发育时期的耳蜗组织标本,采用实时荧光定量PCR (realtime PCR)技术,从转录水平比较各时期两组耳蜗中Kir4.1基因的表达水平;同时,利用冰冻切片免疫荧光染色结合定量分析,从蛋白水平进一步检测该基因在两组耳蜗中的表达变化。
结果:在正常对照组,出生后3天(P3)的小鼠耳蜗中Kir4.1高表达,至P30则明显降低。在Cx30基因敲除小鼠中,P3期Kir4.1的表达水平与野生型小鼠相似,而P30期该基因的表达量仍然保持在较高水平,没有明显下调。
结论:出生后,Kir4.1在小鼠耳蜗侧壁的表达量随着生长发育而增加,而Cx30基因的敲除并没有抑制各发育期Kir4.1基因在内耳的表达。Cx30基因敲除导致的耳聋不是通过下调Kir4.1基因在内耳的表达来实现的。
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