梓葛冻干粉针对人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用

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  目的:研究中药单体组方梓葛冻干粉针对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧复氧损伤的保护作用。方法:体外培养HUVECs,采用Krebs液建立缺氧-复氧损伤模型。用梓葛冻干粉针干预后,采用MTT比色法测定细胞活力、黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量、硝酸还原酶法测定一氧化氮(N0)含量、2,4-二硝基苯肼显色法测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH)释放量;Western blot法分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果:与模型组相比,梓葛冻干粉针12.5 mg·L-1显著提高细胞活力(P<0.05);梓葛冻干粉针49.0 mg·L-1,24.5 mg·L-1,12.5 mg·L-1均显著提高缺氧-复氧后细胞SOD活性(P<0.05);梓葛冻干粉针12.5 mg·L-1,24.5 mg·L-1能显著减少LDH的释放量及降低MDA和NO的含量(P<0.05),并上调细胞Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01);梓葛冻干粉针49.0 mg·L-1,24.5mg·L-1,12.5 mg·L-1显著降低Bax的表达并上调Bcl-2/Bax(P<0.05,P<0.01),且梓葛冻干粉针24.5 mg·L-1,49.0 mg·L-1显著降低Caspase-3的表达(P<0.01)。结论:梓葛冻干粉针可显著拮抗缺氧-复氧对人脐静脉内皮细胞的损伤,其机制与抑制细胞自由基的产生、提高抗氧化能力及调节凋亡相关蛋白表达密切相关。
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