【摘 要】
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目的：本文探讨了醋酸铅诱导体外培养大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用,并揭示其凋亡通路,为研究醋酸铅的肾脏毒性作用及机制奠定基础.方法：以大鼠肾小管上皮细胞系NRK为细胞模型,MTT法检测不同剂量的醋酸铅对其增殖的抑制率；染毒浓度为0,0.5,1.0,2.0μmol/L,作用12h后,通过Hoechst33342和Annexin V-FITC/PI双染法检测醋酸铅引起的NRK凋亡；用罗丹明123检测醋酸
【机 构】
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College of Animal Science and Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengzhou, Henan 4
【出 处】
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中国畜牧兽医学会第三届中国兽医临床大会
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目的：本文探讨了醋酸铅诱导体外培养大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用,并揭示其凋亡通路,为研究醋酸铅的肾脏毒性作用及机制奠定基础.方法：以大鼠肾小管上皮细胞系NRK为细胞模型,MTT法检测不同剂量的醋酸铅对其增殖的抑制率；染毒浓度为0,0.5,1.0,2.0μmol/L,作用12h后,通过Hoechst33342和Annexin V-FITC/PI双染法检测醋酸铅引起的NRK凋亡；用罗丹明123检测醋酸铅线粒体膜电位；用分光亮度法、western blot分别检测caspase-3和caspase-9的活性及其蛋白的表达,以及caspase广谱抑制剂和caspase-9的抑制剂(Z-VAD-FMK和Ac-LEHD-FMK)对醋酸铅诱导细胞凋亡的抑制作用.结果：与空白组相比,细胞存活率明显下降(P＜0.05或P＜0.01),醋酸铅抑制细胞增殖,IC50为2.44±0.32μmol/L；凋亡检测表明,随着醋酸铅浓度的升高,细胞凋亡现象越明显；醋酸铅可能通过caspase依赖性的线粒体凋亡途径诱导NRK凋亡；主要表现在：减低线粒体膜电位,抑制caspase-3和-9的活性,激活体caspase-3和-9表达呈剂量依赖性增加：Caspase广谱和caspase-9抑制剂能显着抑制醋酸铅诱导的细胞凋亡.结论：醋酸铅抑制NRK细胞增殖,可能通过caspase依赖性的线粒体途径诱导细胞凋亡.
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